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白細胞介素18,人IL-18 ELISA檢測試劑盒操作指南

更新時間:2024-10-11      瀏覽次數(shù):456

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人ANGPTL3單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的ANGPTL3與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中 ADP 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在 450 nm 波長測定吸光度值。


 

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1. 96孔讀板儀器。 

2. 自動洗板機. 

3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。 

4. Eppendorf 管。 

生物安全

1、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定,嚴格防止交叉污染,所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進行處置。

2、試劑盒的液體組分中,含有proclin-300防腐劑,可能引起皮膚過敏反應(yīng),避免吸入煙霧與皮膚接觸。

3、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入煙霧。戴上防護手套,實驗完成后洗手。

技術(shù)提示

1、混合蛋白溶液時,避免起泡。

2、加校準品與樣本時,每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。

3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。

4、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。

5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍色底物產(chǎn)物,會瞬間變?yōu)辄S色。

6、實驗中,用剩的板條,應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

7、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。

廢物處理

  所有使用或未使用的試劑,所有污染性的一次性材料,應(yīng)當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序,每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別,進行廢物和污物的處理,同時要嚴格依照有關(guān)規(guī)定對待所有的廢物和污物。

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