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人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒操作程序洗板方法

更新時(shí)間:2020-08-17      瀏覽次數(shù):834

人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒操作程序洗板方法

品牌:RENJIEBIO

產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T

保存:2-8℃,避光保存

庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨供應(yīng)

有效期:六個(gè)月

注:僅用于科研,不得用于臨床診斷
常見問(wèn)題

ELISA操作注意事項(xiàng)如下:(1) 加樣:在ELISA中除了包被外,一般需進(jìn)行4~5次加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性,例如規(guī)定為加樣1滴。此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管,保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì),使每滴液體的體積基本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。(2) 孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加結(jié)合物后,此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中,以平衡溫度,這一步驟在室溫較低時(shí)更為重要。加入底物后,反應(yīng)時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。(3) 洗滌:洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是反應(yīng)步驟,但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。(4)顯色及終止反應(yīng):顯色是酶促反應(yīng),應(yīng)按規(guī)定的溫度和時(shí)間操作,用酸終止。(5) 結(jié)果判斷:用比色計(jì)測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比色計(jì)的質(zhì)量。


組成及試劑配制
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
操作說(shuō)明:1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

客戶常見問(wèn)題解析:
1、代測(cè)收費(fèi)情況?幫忙處理標(biāo)本收費(fèi)嗎?
答:客戶購(gòu)買我們的試劑盒的前提下,代測(cè)服務(wù)是免費(fèi),只收取試劑盒費(fèi)用;老師的樣本也是免費(fèi)處理的。
2、不同批的試劑能不能用?
答:同樣的盒子不同的批號(hào)或是同一個(gè)批號(hào),也是不建議混用的,同樣的盒子,分兩次的結(jié)果應(yīng)該是不一樣的,但數(shù)據(jù)部應(yīng)相差太大 應(yīng)在可控制或接受范圍,不同批號(hào)的不可以混用 原因很簡(jiǎn)單若不同批號(hào)的混用的話 可能得出的結(jié)果不是您想要的 數(shù)據(jù)可能偏差較大

 

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